- 所属部署
- 医学部生化学講座
- 申請年度
- 2020年度
- キーワード
- ゲノム編集 CRISPR/Cas9 TPN法
- 研究結果の概要
- ゲノム編集のノックインは、標的タンパク質を永続的に改変させられる有用な技術である。しかし現在主流のノックイン法には、意図しない塩基配列の挿入・欠失（indels）が高確率で発生するという問題がある。申請者はこの問題の改善に取組み、2020年、高いノックイン効率を維持しつつ、indelsの発生を劇的に低減できるノックイン法、Tandem Paired Nicking法（TPN法）を報告した（Cell Rep., 2020）。
申請者は本研究課題であるTPN法のさらなる改良と臨床応用を実現するため、まずTPN法のより効率的な動作条件を解析した（Sci Rep., 2021）。また細胞表面タンパク質をコードする内在性遺伝子を標的とするノックインとフロ―サイトメトリーを用いることで、ゲノム編集効率を簡単に評価できる方法を確立した（Biosci Rep., 2021; Mol Biol Rep., 2022; PLoS One, 2023）。申請者は現在もTPN法の臨床応用を目指した研究を進めている。
- 公表論文
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Experimental strategies to achieve efficient targeted knock-in via tandem paired nicking., Scientific Reports, 2021年, 11巻, 1号, 22627
Flow cytometry-based quantification of targeted knock-in events in human cell lines using a GPI-anchor biosynthesis gene PIGP., Bioscience Reports, 2021年, 41巻, 12号, BSR20212231
Correction of a CD55 mutation to quantify the efficiency of targeted knock-in via flow cytometry., Molecular Biology Reports, 2022年, 49巻, 7号, 6241-6248
Flow cytometry-based quantification of genome editing efficiency in human cell lines using the L1CAM gene., PLoS One, 2023年, 18巻, 11号, e0294146
Leucine zipper protein 1 (LUZP1) regulates the constriction velocity of the contractile ring during cytokinesis., The FEBS Journal, 2024年, 291巻, 5号, 927-944
