バーコード標識 iPS細胞を用いた腎臓オルガノイド分化・成熟過程における細胞系譜の追跡
- プログラム
- 医学系研究助成 基礎
- 所属機関
- 山梨大学
- 所属部署
- 大学院総合研究部医学域内科学講座第3教室
- 申請年度
- 2021年度
- キーワード
- iPS細胞 腎臓 オルガノイド シングルセルRNAシーケンス
- 研究結果の概要
- バーコード配列を搭載したレンチウイルスをあらかじめiPS細胞に感染させて個別標識した後に腎臓オルガノイドへ分化させ、経時的にscRNAseqを行うことで同一バーコードを引き継いだ実際の娘細胞を追跡し、個々のクローンを直接的に比較することで運命決定因子の同定を試みた。GFP陽性のバーコードウイルス感染細胞は腎臓オルガノイドへの分化に成功した細胞では消失し、未分化細胞に残存するという結果であった。シーケンスデータの解析を行ってもバーコードを認識できる細胞のほとんどが腎臓オルガノイドへの分化に失敗した未分化細胞であった。本研究の継続には①感染効率の上昇、②分化の過程における遺伝子抑制効果、に対するアプローチが必要と考えられた。
- 公表論文