研究題目
- 所属部署
- 医学部小児外科学講座
- 申請年度
- 2021年度
- キーワード
- ヒルシュスプルング病 腸管神経 ES細胞 再生医療
- 研究結果の概要
- 本大学動物モデルセンター多田の技術的指導の下でSOX10-VENUSトランスジェニックマウスES細胞（SV-mES）の樹立を行うことに成功した。その後フィーダーレス化をはかり、増産し凍結保存をした。腸管神経前駆細胞への分化誘導を開始。作成したSV-mES細胞を特定のサイトカイン・増殖因子（bFGF、EGF）を含む無血清培地にて培養開始し、EB（胚葉体）をハンギングドロップ法で作成。EB細胞を分化培地で培養開始すると３日目から蛍光顕微鏡下でVenus陽性細胞が確認された。リアルタイムRT-PCRでもSOX10の発現を確認。さらにFACSでVenus陽性のみを回収し、より効率的に神経前駆細胞への分化を図るが、生存率が悪くその後の分化誘導まで進まなかった。今度は浮遊培養での神経前駆細胞への誘導を試行予定である。
我々は、本研究期間に基盤となる新規マウスES細胞の樹立に成功し、神経前駆細胞への分化誘導方法確立のための実験系が構築された。今後は効率的な分化誘導方法の検証と、in vivo移植実験をおこない、実際の移植細胞の生着・分化傾向について解析する予定である。
- 公表論文
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